苦瓜基因转化方法
苦瓜基因转化方法主要包括以下几种:
农杆菌介导的遗传转化
使用含质粒载体的根癌农杆菌(如pBI121)转化苦瓜外植体(如子叶节)。
通过预培养、侵染、共培养等步骤,将外源基因(如gus基因、Pti4基因、MAP30基因等)导入苦瓜基因组中。
再生植株通过PCR等分子检测方法验证基因的整合情况。
发根农杆菌介导的高频诱导及遗传转化
利用R1000发根农杆菌感染苦瓜试管苗的茎段或子叶盘,在含IBA50的MS培养基中共培养,诱导出发根。
高效稳定的苦瓜离体再生体系
通过优化不定芽诱导、继代培养、生根培养等步骤,建立适用于多基因型的苦瓜高效再生体系。
基因枪法
虽然未在提供的文档中详细描述,但基因枪法也是一种常用的植物基因转化方法,通过将外源DNA包裹在金粒中,利用高速喷射将DNA直接导入植物细胞。